1、配料：配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱(chēng)取各種藥品→加足所需水量。

 

　　2、溶解：

　　淀粉溶解：少量冷水調(diào)成糊狀

　　加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養(yǎng)基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95～97℃，且需要邊

　　加熱邊攪拌以防止燒焦。

 

　　3、調(diào)pH：用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到所要求的值。

 

　　4、過(guò)濾：濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。

 

　　5、分裝：一般培養(yǎng)基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

 

　　6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。

 

　　7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)被破壞，培養(yǎng)基中的糖、氨基酸會(huì)使培養(yǎng)基的顏色變深。

 

　　8、擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個(gè)斜面，約占試管長(zhǎng)度的1/2。

 

　　9、貯存：培養(yǎng)基在30℃下放置一天，無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

 

　　Gibco液體培養(yǎng)基的操作步驟：

　　1、準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

 

　　2、校正ph值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線(xiàn)，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度。

 

　　3、過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

 

　　4、分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備。

 

　　5、培養(yǎng)基的，常用高壓蒸汽法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽才能達(dá)到的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽比干熱法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。